野外植物实习的实践

　　通过查阅文献、资料，结合植物检疫实验室实际具体工作，阐述了国内外实验室生物安全建设与管理现状、国内外植物检疫实验室建设现状、生物安全相关的法律法规及标准规范。针对目前国内植物检疫实验室生物安全的现状，提出存在的问题及建议，以及思考与展望。

　　关键词：植物检疫；生物安全；现状

　　广义上讲，生物安全是国家安全的组成部分，它是指与生物有关的各种因素对国家社会、经济、人民健康及生态环境所产生的危害或潜在风险。狭义上讲，生物安全是生物性的传染媒介通过直接感染或间接破坏环境而导致对人类、动物或者植物的真实或者潜在的危险。植物检疫实验室生物安全是指为避免植物检疫实验室危险性有害生物向外传播、扩散，并导致农林业生产、生态环境危害所采取的综合措施，侧重于对人类赖以生存的环境的保护［１］。植物检疫实验室属于生物类实验室，主要工作是对植物及植物产品上可能携带的危险性有害生物进行检测和检疫鉴定，其中大部分有害生物虽然与其他生物类实验室，如医学、动物检疫研究的使人直接致病、人畜共患的病原物不同，它们对人类生理健康一般不构成威胁，但它们的传播和扩散却导致农业生产、生态环境及经济的巨大损失［２］。

　　１国内外实验室生物安全建设与管理现状

　　１．１国外实验室生物安全建设与管理现状

　　实验室生物安全的概念于２０世纪４０年代首先在美国提出，主要是对当时部分实验室意外事故原因进行了调查和分析，提出预防实验室感染应采取的对策。在２０世纪５０—６０年代，美国为保障实验室工作人员的安全与健康、减少实验室意外事故感染，建立了全球首个生物安全实验室。世界卫生组织（ＷＨＯ）于１９８３年出版了《实验室生物安全手册》，目前已更新至第三版［３］。国外在实验室生物安全规范化管理方面起步较早，如美国、加拿大、法国等国家积累了一定的经验。美国疾病预防控制中心和美国国立卫生研究院早在１９８３年就联合出版了《微生物学及生物医学实验室生物安全准则》，２００７年出版了第５版，与ＷＨＯ出版的《实验室生物安全手册》一同成为很多国家在制定本国生物安全法律法规和准则规范时的主要参考标准［４］。各国针对实验室生物安全防护采取的规范、标准基本一致。据维基百科公开资料显示，截至２０１６年，法国、加拿大、德国、澳大利亚、美国、俄罗斯、瑞典、南非、日本、巴西、印度等国已建成的生物安全实验室ＢＳＬ－４设施至少４５家。１９８１年荷兰农渔部植保局建造了一个具有现代化设施的检疫温室，用于隔离种植从国外引进的植物和试验植物［５］。

　　１．２国内实验室生物安全建设与管理现状

　　我国的生物安全实验室建设最早可追溯到２０世纪８０年代。为了研究流行性出血热的传播机制，１９８７年在军事医学科学院修建了我国第一个国产三级生物安全实验室。１９９３年以后，我国开始仿建、自建部分生物安全实验室。之后，我国生物安全实验室建设进入弹性、探索性的缓慢发展阶段。“炭疽粉末事件”、ＳＡＲＳ疫情及我国内地ＳＡＲＳ实验室感染事件、国际生物恐怖主义的涌现，引起了我国政府对生物安全实验室建设的高度重视［６］。而我国在实验室生物安全管理领域发展较晚，实验室生物安全法规建设也相对滞后。在ＳＡＲＳ暴发后，我们国家高度吸取教训，不断提高对生物安全重要性的认识，采取了有效措施，切实加强了实验室生物安全管理，并陆续出台了《实验室生物安全通用要求》（ＧＢ１９４８９）、《病原微生物实验室生物安全管理条例》（国务院令第４２４号）等有关实验室生物安全的规范与标准。生物安全实验室认可制度就是在我国遭受ＳＡＲＳ病毒之后，为补足实验室生物安全技术的短板，逐步建立起来的我国特有的国家认可制度。２０１７年，中国科学院武汉国家生物安全实验室建成的首个四级生物安全防护实验室通过中国合格评定国家认可委员会（ＣＮＡＳ）认可，这也是亚洲首个Ｐ４实验室［７］。２０１８年７月，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家动物疫病防控高级别生物安全实验室通过认可。此外，还有近５０家生物安全三级实验室和２０余家生物安全二级实验室通过认可。

　　２国内外植物检疫实验室生物安全建设现状

　　植物检疫实验室属于生物类实验室，是国家植物检疫技术支撑体系的基础部门，主要是对植物及其产品上可能携带的危险性有害生物进行检疫鉴定［８］，它与医学、动物检疫实验室不同的是：它所涉及的有害生物对人类生理健康一般不造成威胁，但它的传播和扩散却可导致农业生产、生态环境及经济的巨大损失。实验室的建筑设计或改造应确保达到有害生物防护水平及经过评估的相应风险程度，防止有害生物向实验室外扩散和传播。美国最早应用于境外进入的有益昆虫检疫的植物检疫实验室起源于２０世纪２０年代［２］。早在２０世纪７０年代美国已建立农业生物安全设施和研究中心，如天敌昆虫引进研究中心创立于１９７３年，外来病害研究中心成立于１９７９年。美国农业生物安全设施组合有大量的生物安全２～３级设施，还有几个生物安全达到４级的实验室［９－１０］。这些都体现了农业生物反恐的特点和在创新能力建设上的高度前瞻性。植物隔离检疫是指国家植物检疫机构对进口的植物种苗等繁殖材料进行隔离、试种，观察其在生长期间病、虫、草害的发生情况，检出无明显症状的病害或口岸不易检出的有害生物，防止因漏检情况的发生而使危险性病、虫、杂草传入我国。我国已颁布了《进境植物繁殖材料隔离检疫圃管理办法》（２０１８年４月２８日修订）、《隔离检疫圃分级》（ＧＢ／Ｔ２３４１５—２００９）、《植物检疫隔离圃分级标准》（ＳＮ／Ｔ１６１９—２０１７）等涉及植物隔离检疫温室的标准。目前，国内比较成熟的隔离检疫圃／温室主要有：国家植物检疫隔离检疫温室、中国检验检疫科学研究院双桥植物隔离试验场、海南热带植物隔离检疫圃、深圳植物隔离检疫温室、上海植物隔离检疫温室等。我国植物生物安全设施整体落后于发达国家。相对于医学类、动物检疫类实验室，植物检疫实验室生物安全标准化工作亦相对滞后。迄今为止，国内外还没有植物检疫实验室生物安全工作规范的出台。据有关部门统计，截至２０１７年８月，全国已获认可的植物检疫实验室有１０４家。植物检疫实验室作为我国生物安全实验室的重要组成部分之一，在国家生态安全应急体系和生物防范体系中发挥着核心作用，而这方面的研究却很少［１－２，１１－１５］。

　　３生物安全相关的法律法规及标准规范

　　３．１国内现行法规和标准

　　国内现行法规和标准如下：《兽医微生物菌种保藏管理试行办法》（１９８０）；《中国医学微生物菌种保藏管理办法》（１９８５）；《中华人民共和国进出境动植物检疫法》（１９９２）；《中华人民共和国进出境动植物检疫法实施条例》（１９９５）；《中华人民共和国动物防疫法》（１９９７）；《农业转基因生物安全管理条例》（国务院令第３０４号，２００１年５月２３日）；《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》（ＷＳ２３３—２００２）；《兽医实验室生物安全技术管理规范》（２００３）；《兽医实验室生物安全管理规范》（２００３）；《不同生物安全级别微生物菌种操作规程》（２００４）；《病原微生物实验室生物安全管理条例》（国务院令第４２４号，２００４年１１月５日）；《高致病性动物病原微生物实验室生物安全管理审批办法》（２００５）；《高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范》（２００５）；《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》（２００６）；《病原微生物实验室生物安全环境管理办法》（２００６）；《出入境口岸疾病监测实验室生物安全操作标准》（ＳＮ／Ｔ１８３４—２００６）；《境外引进植物隔离检疫规程》（ＮＹ／Ｔ１２１７—２００６）；《出入境口岸医学媒介生物实验室病原学检测生物安全标准》（ＳＮ／Ｔ１８６２—２００７）；《实验室生物安全通用要求》（ＧＢ１９４８９—２００８）；《生物安全饲养室准则》（ＳＮ／Ｔ２３７５—２００９）；《隔离检疫圃分级》（ＧＢ／Ｔ２３４１５—２００９）；《引进植物病原生物安全控制技术要求》（ＧＢ／Ｔ２３６２９—２００９）；《人间传染的病原微生物菌（毒）种保藏机构管理办法》（卫生部６８号令，２００９年１０月１日）；《兽医实验室生物安全要求通则》（ＮＹ／Ｔ１９４８—２０１０）；《人间传染的病原微生物菌（毒）种保藏机构设置技术规范》（ＷＳ３１５—２０１０）；《生物安全实验室建筑技术规范》（ＧＢ５０３４６—２０１１）；《进出境动物Ａ型Ｈ１Ｎ１流感检疫生物安全规范》（ＳＮ／Ｔ２８４５—２０１１）；《检验检疫动物病原微生物实验活动生物安全要求细则》（ＳＮ／Ｔ２９８４—２０１１）；《种苗隔离检疫操作规程》（ＳＮ／Ｔ３０７２—２０１１）；《植物检疫性有害生物实验室生物安全操作规范》（ＳＮ／Ｔ３６８９—２０１３）；《检验检疫二级生物安全实验室通用要求》（ＳＮ／Ｔ３９０２—２０１４）；《临床实验室生物安全指南》（ＷＳ／Ｔ４４２—２０１４）；《突发林业有害生物事件处置办法》（２０１５）；《移动式实验室生物安全要求》（ＧＢ２７４２１—２０１５）；《高级别生物安全实验室体系建设规划（２０１６—２０２５年）》（科技部２０１６年１１月３０日）；《动物检疫实验室生物安全操作规范》（ＳＮ／Ｔ２０２５—２０１６）；《人间传染的高致病性病原微生物实验室和实验活动生物安全审批管理办法》（２０１６）；《植物隔离检疫圃分级标准》（ＳＮ／Ｔ１６１９—２０１７）；《出入境动物检疫实验室生物安全分级技术要求》（ＳＮ／Ｔ２０２４—２０１７）；《病原微生物实验室生物安全通用准则》（ＷＳ２３３—２０１７）；《进境植物繁殖材料隔离检疫圃管理办法》（２０１８年４月２８日修订）。

　　３．２国内实验室生物安全认可文件

　　《实验室生物安全认可准则》（ＣＮＡＳ－ＣＬ０５：２００９）；《实验室设备生物安全性能评价技术规范》（ＲＢ／Ｔ１９９—２０１５）；《实验室生物安全认可规则》（ＣＮＡＳ－ＲＬ０５：２０１６）；《移动式生物安全实验室评价技术规范》（ＲＢ／Ｔ１４２—２０１８）；《实验室生物安全认可准则对移动式实验室的应用说明》（ＣＮＡＳ－ＣＬ０５－Ａ００１：２０１８）；《实验室生物安全认可准则对关键防护设备评价的应用说明》（ＣＮＡＳ－ＣＬ０５－Ａ００２：２０１８）；《检测和校准实验室能力认可准则在植物检疫领域的应用说明》（ＣＮＡＳ－ＣＬ０１－Ａ０１４：２０１８）；《实验室内部研制质量控制样品的指南》（ＣＮＡＳ－ＧＬ００５２０１８）。

　　３．３国际实验室生物安全相关规范

　　《微生物和生物医学实验室生物安全指南》（美国，第四版，１９９９）；《实验室生物安全指南》（加拿大，第三版，２００１）；《医学实验室安全要求》［ＩＳＯ１５１９０：２００３（Ｅ）］；《实验室生物安全手册》（世界卫生组织，第三版，２００４）；《ＮＩＨ涉及重组ＤＮＡ研究的生物安全指南》（美国）；《加拿大兽医生物安全设施防护屏障标准》（加拿大，第三版）；《特定动物病原体条例》（英国）；《兽医生物安全设施———设计与建造手册》（国际兽医生物安全工作组）。

　　４国内植物检疫实验室生物安全建设存在的问题及建议

　　目前，我国植物检疫实验室生物安全管理方面已形成了规范化管理体系［１６］，但仍存在一些不足之处：①我国对于植物检疫实验室生物安全的设计、建设及运行等经验不足，其重要性认识不到位；②相对于医学类、动物检疫类等生物实验室，植物检疫实验室的生物安全标准化工作相对滞后，迄今为止，国内外还未有植物检疫实验室的生物安全工作规范的出台；③植物检疫实验室生物安全存在的隐患研究不足，未形成系统化研究成果。针对上述不足，特提出如下建议：①广泛借鉴国外植物检疫实验室在建设、管理及运行中的先进经验，提高思想认识，尤其是加强对植物检疫实验室生物安全建设和管理方面的研究需引起足够重视；②结合当前国内植物检疫实验室现状，总结出适合植物检疫实验室生物安全需要的标准化管理方法，出台系列标准／规范及认可准则等来指导实践工作；③加强对植物检疫实验室生物安全防护水平分级、关键控制点及检疫性有害生物分级原则等展开深入研究，将形成的系列研究成果转化为现实需要。

　　５思考与展望

　　在我国进出境植物及植物产品检疫工作中，植物检疫实验室发挥了重要的技术支撑作用，而对于植物检疫实验室的生物安全而言，往往更侧重于对环境和生态的保护，主要包括防止有害生物逃逸和扩散、防止交叉污染、保护人员健康等。实验室一旦发生包括害虫在内的有害生物的逃逸、传播和扩散，将对农业生产、生态系统带来不可估量的损失。为使植物检疫实验室生物安全风险因子能得到明确地识别及有效地控制，也为今后社会各行业新建植物检疫类实验室具有完善的生物安全风险防范意识，针对当前植物检疫实验室生物安全现状，下一步应对植物检疫实验室存在生物安全隐患及风险评估、植物检疫实验室防范生物安全关键控制点管理措施、植物检疫实验室生物安全建设及管理技术等方面展开深入研究，从国家层面陆续出台相应的规范、措施等，以指导实际工作。

　　作者：阎春兰 程国军 文田 陈思礼 司晓棠 何冬兰